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小型魚類開発研究室・酒井研究室

ゼブラフィッシュの精子を用いた遺伝子改変と近交系樹立
准教授         酒井 則良      nosakai 
助  教         新屋 みのり       mshinya 
研究室 URL :  http://www.nig.ac.jp/labs/FishDev/index.html
  ゼブラフィッシュは、胚が透明で発生過程で働く遺伝子を容易に見いだすことができるため、優れた実験動物として発展してきています。私たちの研究室ではin vitroで分化した精子を用いて遺伝子改変魚を作出する技術を確立しました。精子を用いた遺伝子改変ではその遺伝情報が受精個体の全ての細胞に伝わるため、迅速に遺伝子改変個体を作出できるという利点があります。現在、この方法による逆遺伝学的手法の確立を進めています。一方で、この培養系は雄生殖細胞の体細胞分裂と減数分裂を制御する機構の解析にも優れています。精子形成異常の突然変異体とin vitro培養系を用いて、脊椎動物に普遍的な精子形成制御因子の研究を同時に進めています。
  また、遺伝的背景が均一な近交系の樹立を試みています。遺伝学的解析に非常に有用な近交系なのですが、ゼブラフィッシュでは作られていません。そこで、兄妹交配を繰り返して継代を行い、近交系樹立にまであと数世代のところまでたどり着いています。さらに、樹立中の系統を生かした解析系の検討も含めて研究を行なっています。

アデノウイルスベクターによるゼブラフィッシュ雄生殖細胞への遺伝子導入。(A)EGFP遺伝子を導入した精原細胞。(B) EGFP遺伝子を導入した二次精母細胞。

Kawasaki, T., Saito, K., Shinya, M., L. Olsen, LC., and Sakai, N. (2010) Regeneration of spermatogenesis and production of functional sperm by grafting of testicular cell aggregates in zebrafish. Biol. Reprod. 83, 533-539

Kawasaki, T., Saito, K., Mitsui, K., Ikawa, M., Yamashita, M., Taniguchi, Y., Takeda, S., Mitani, K., and Sakai, N. (2009). Introduction of a foreign gene into zebrafish and medaka cells using adenoviral vectors. Zebrafish 6, 253-258.

Hashiguchi, M., Shinya, M., Tokumoto, M., and Sakai, N. (2008). Nodal/ Bozozok-independent induction of the dorsal organizer by zebrafish cell lines. Dev. Biol. 321, 387-396.

Kimura, T., Shimada, A., Sakai, N., Mitani, H., Naruse, K., Takeda, H., Inoko, H., Tamiya, G., and Shinya, S. (2007) Genetic analysis of craniofacial traits in the medaka. Genetics 177, 2379-2388.

Sakai, N. (2006). In vitro male germ cell cultures of zebrafish. Methods 39, 239-245.

酒井則良 (2007). ゼブラフィッシュにおけるin vitroの精子形成. 蛋白質核酸酵素, 52, 2124-2129.

准教授
酒井 則良
nosakai 
助 教
新屋 みのり
  mshinya